化学通报

作者：尹 玲,王安娜,赵梦,沙靖全,白永香,史海斌

关键词：基质金属蛋白酶-2 金纳米棒,荧光共振能量转移 分子探针,荧光成像,

开发能特异性和灵敏性检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的智能型荧光分子探针,对于癌症的早期精准诊断与治疗至关重要。本文基于MMP-2特异性识别的多肽底物,利用一价铜离子催化的“点击”化学反应将荧光素(FITC)和多肽底物GPLGVRGY相耦联,与SH-PEG-COOH修饰的金纳米棒在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基硫代琥珀酰亚胺钠盐(Sulfo-NHS)的作用下通过酰胺化反应,制备得到一种新的MMP-2特异性响应的荧光共振能量转移(FRET)金纳米棒探针GNR@FITC。首先,将探针与MMP-2在缓冲液中孵育,通过对溶液在520 nm处荧光信号变化的跟踪检测,对探针的特异性和检测灵敏度进行了评估。体外重组酶检测实验结果表明,探针对MMP-2具有较强的特异性和选择性,最低检测限可达1.28 ng.mL-1。此外,基于小鼠乳腺癌细胞4T1的3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝(MTT)实验结果表明,探针在0-96 μg.mL-1浓度范围内对4T1细胞存在较低的毒性。细胞共聚焦显微成像实验结果显示,相比于小鼠成纤维细胞NIH/3T3,4T1细胞在与探针孵育后,产生出较强的绿色荧光信号。如预先加入抑制剂,细胞的荧光信号则大大减弱。总之,该探针对MMP-2过表达小鼠乳腺癌细胞4T1表现出较好的特异性和检测灵敏度,具有进一步开发应用于乳腺癌早期诊断的极大潜力。

来源：2019年第1期

《化学通报》期刊编辑部

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